人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA原理检测人样本中靶向核糖核酸酶(TR)含量。微孔板预先包被TR特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的TR抗原与固相抗体特异性结合，洗除未结合的非特异性物质。加入HRP标记的TR检测抗体，构建稳定的夹心免疫复合物，洗涤干净后加入TMB显色底物，在HRP酶的催化下发生显色反应，终止反应后测定吸光度。样本中TR浓度越高，显色越深，吸光度值越高，结合标准曲线可实现TR的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：≤4pg/mL

检测范围：15pg/mL–950pg/mL

反应时间：室温孵育 65min，二抗 45min，显色 13min

显色系统：OPD 显色终止体系

检测波长：490nm

特异性：不结合 RNase A、RNase H 等其他核糖核酸酶

重复性：板内 CV≤5.2%，板间 CV≤7.3%

注意事项：操作全程避免核酸酶污染耗材，防止靶蛋白降解
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 34min 充分回温，取出预包被酶标板，排布实验孔并标注编号。

标准品孔加入倍比稀释 TR 标准品 50μL；样本孔加入上清稀释待测样本 50μL；空白孔不加任何试剂。

全部检测孔加入一步法酶标记结合抗体液 50μL，缓慢晃动酶板混匀，封膜封口。

37℃恒温避光孵育 74min，维持孵育温度恒定。

弃液后洗板液浸泡每孔 42s，吸水纸拍干，重复洗板 6 次。

每孔依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，避光混匀，37℃避光显色 18min。

加入终止液 50μL 终止反应，混匀后 5min 内 450nm 测定吸光度，计算 TR 蛋白浓度。