人阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术检测人样本中的阿黑皮素原(POMC)水平。微孔板固相载体包被POMC特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的POMC抗原与固相抗体特异性结合，经洗涤去除未结合杂质。随后加入HRP标记的POMC检测抗体，形成固相抗体-POMC抗原-酶标抗体夹心复合物，再次洗涤后加入TMB底物显色，酶催化底物发生氧化反应生成蓝色显色物，终止反应后转为黄色。酶标仪检测450nm吸光度值，吸光度与样本中POMC浓度呈正比例关系，依托标准曲线可精准定量POMC含量。
产品参数：

‌灵敏度：≤15pg/mL

检测范围：50pg/mL–2500pg/mL

反应时间：室温样本孵育 90min，酶结合物孵育 60min，显色 15min

显色系统：HRP-TMB 显色

检测波长：450nm，参考 620nm

特异性：可特异性识别人 POMC 前体蛋白，不识别其剪切后单肽片段

重复性：板内 CV≤5%，板间 CV≤7%

注意事项：血浆样本需添加蛋白酶抑制剂，防止 POMC 被降解
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 28min，取出酶标板，根据样本数量截取对应板条，设置标准孔、样品孔、空白对照孔。

标准品孔加入系列稀释 POMC 标准品 50μL；待测孔加入经离心过滤处理的体液样本 50μL；空白孔不加试剂。

向所有非空白孔加入一步法一抗酶偶联工作液 50μL，轻晃酶标板混匀，封膜封口。

37℃恒温孵育 65min，孵育过程中酶标板平放无倾斜。

弃除孔内液体，洗板液填充微孔，静置 30s 后拍干，重复洗板 5 次，保证孔底无游离未结合物质。

每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL，避光混匀，37℃暗处显色 16min。

加入终止液 50μL 混匀终止反应，酶标仪 450nm 读值，绘制标准曲线计算样本 POMC 含量。