人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板预先包被人胆碱乙酰化酶特异性抗体，样本中的CHAc抗原与固相抗体特异性结合，洗去游离杂质后加入酶标记配对抗体形成免疫夹心复合物，酶促底物显色，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线定量检测样本中胆碱乙酰化酶的含量。
基本参数‌：

产品名称：人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒

英文名称：CHAc Elisa Kit
货号：Y-E991

规格：48T/96T

灵敏度：检出限 0.07U/L

检测范围：0.18U/L - 7.2U/L

反应时间：样本结合 90min，酶标记物 50min，避光显色 22min，总 162min

显色系统：A+B 混合配制 TMB 底物显色

检测波长：450nm，参考 650nm

特异性：区分胆碱乙酰化酶与胆碱酯酶，无明显交叉识别

重复性：板内 CV＜7.9%，板间 CV＜9.2%

注意事项：脑组织样本全程冰上裂解，防止酶蛋白常温失活
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：

整套试剂室温放置 39min，稀释浓缩洗涤液与标准品稀释液，标记酶标板所有孔位用途。

CHAc 梯度标准品每孔加 50μL，脑组织匀浆样本稀释后上样 50μL，空白对照孔添加稀释缓冲液。

所有微孔加入酶标记二抗工作液 100μL，封板密封，震荡混匀 26s。

37℃密闭孵育 74min，环境避光无直射光源。

洗板机自动洗板 5 次，每次浸泡 38s，结束后倒扣拍干板条废液。

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后室温避光显色 21min。

终止液终止显色反应，酶标仪 450nm 读数，拟合标准曲线得出胆碱乙酰化酶浓度。
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