人单纯疱疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔包被人单纯疱疹病毒抗原2特异性抗体，待测样本中的HSV-Ag2抗原与包被抗体特异性结合，洗板后加入酶标记检测抗体形成免疫夹心复合物，酶促底物产生有色产物，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线定量测定样本中HSV-Ag2抗原含量。
基本参数‌：

产品名称：人单纯疱疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA试剂盒

英文名称：HSV-Ag2  Elisa Kit
货号：Y-E754

规格：48T/96T

灵敏度：病毒抗原最低检出 7.5pg/mL

检测范围：20pg/mL - 800pg/mL

反应时间：捕获孵育 92min，酶结合 52min，显色 23min，总 167min

显色系统：HRP 介导 TMB 显色，稀硫酸终止

检测波长：450nm

特异性：直接靶向 HSVⅡ 型病毒抗原，不检测宿主同源蛋白

重复性：板内 CV＜8.2%，板间 CV＜9.8%

注意事项：临床拭子样本充分洗脱后再上样，显色步骤严格避光，不可中途开盖
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温复温 36min，配置洗涤工作液，规划酶标板孔位，区分标准孔、样本孔、空白孔。

HSV-Ag2 梯度标准品每孔加 50μL，病灶组织 / 细胞裂解样本稀释后上样 50μL，空白孔加入稀释液。

每孔加入 HRP 标记抗体工作液 100μL，封板密封，震荡混匀 21s。

37℃避光孵育 66min，抗原与包被抗体、酶标抗体夹心结合。

洗板 6 轮，每轮洗涤液加满微孔浸泡 37s，甩干废液后彻底拍干板条。

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 20min。

终止液终止反应，14min 内 450nm 检测 OD 值，标准曲线计算 HSV-Ag2 抗原含量。
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