人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板固相包被人促肾上腺皮质激素释放因子特异性抗体，样本与标准品中的CRF抗原与包被抗体发生特异性免疫结合，洗涤除去游离成分后，加入辣根过氧化物酶标记的CRF二抗形成免疫复合物，催化底物发生显色反应，终止显色后检测吸光度，依据标准曲线的浓度与吸光度对应关系，定量测定样本中CRF的含量。
基本参数‌：

产品名称：人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒

英文名称：CRF  Elisa Kit
货号：Y-E628

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出限 7pg/mL

检测范围：15pg/mL - 600pg/mL

反应时间：一抗结合 90min，酶标二抗孵育 45min，避光显色 20min，全程约 155min

显色系统：双组分 A+B TMB 显色液，2M H₂SO₄终止

检测波长：450nm 单波长检测

特异性：针对 CRF 抗原决定簇专一识别，与 AVP、ACTH 无明显交叉反应

重复性：板内 CV＜7.5%，板间 CV＜9.0%

注意事项：样本采集后立即低温分装冻存，避免反复冻融；洗板每孔浸泡 30s 再拍干，防止非特异性吸附
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂提前放置室温 25℃环境复温 25min，拆封酶标板条，按需拆取剩余板条密封冷藏留存。

标准品用配套稀释液梯度配制成 5 组浓度梯度，每孔加入 CRF 标准品 50μL；待测样本经预处理稀释后加样 50μL 至样本孔；空白孔仅加稀释液 50μL。

每孔加入 HRP 标记抗 CRF 抗体工作液 100μL，覆膜封板，横向轻晃酶标板 10s 混匀体系。

置于 37℃水浴恒温箱避光孵育 45min，全程防止封板膜脱落漏液。

手动洗板：每孔注满洗涤液浸泡 40s，倒扣甩去废液，重复洗板 4 次，吸水纸充分拍干微孔。

避光条件下每孔添加显色底物液 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光反应 12min，观察孔内蓝色显色程度。

加入终止液 50μL 终止反应，酶标仪调至 450nm 读取吸光度，根据标准曲线拟合换算样本 CRF 含量。
公司正在出售的产品：