人雌激素诱导蛋白PS2 ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板包被人PS2特异性捕获抗体，加入待测样本后特异性结合样本中的雌激素诱导蛋白PS2，孵育反应后洗涤去除游离杂质，加入酶标检测抗体形成稳定的免疫夹心复合物，洗涤净化体系后加入显色底物，酶促显色强度与样本中PS2蛋白含量正相关，通过酶标仪读数及标准曲线计算完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人雌激素诱导蛋白PS2 ELISA试剂盒

英文名称：Estrogen-induced protein pS2  Elisa Kit
货号：Y-E748

规格：48T/96T

灵敏度：0.04ng/mL

检测范围：0.12ng/mL–7.68ng/mL

反应时间：105min，样本 60min，酶二抗 30min，显色 15min

显色系统：HRP 催化底物显色

检测波长：450nm

特异性：专一识 PS2 蛋白，乳腺肿瘤相关同源蛋白无交叉

重复性：批内 CV＜6.4%，批间 CV＜8.3%

注意事项：细胞上清样本去除细胞碎片；洗板步骤严格按照说明书次数操作。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂室温放置 32min，梯度稀释 PS2 标准蛋白，标记酶标板标准孔、肿瘤组织待测孔、空白孔。

移液加注梯度标准液、组织匀浆上清样本、空白稀释液至微孔。

一步加入酶偶联抗体工作液封板，37℃避光孵育 67min 夹心免疫结合。

揭膜弃液，洗板 6 次，浸泡 45s 每次，充分洗板后拍干。

显色混合底物避光显色 18min。

终止液终止反应并混匀体系。

450nm 读取 OD 值，计算 PS2 蛋白表达量，整理实验基础数据。
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