大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板包被大鼠CXC趋化因子配体16（CXCL16）特异性捕获抗体，样本中的CXCL16抗原与固相抗体特异性结合，再结合酶标检测抗体形成免疫复合物，显色后吸光度值与样本中CXCL16含量呈正相关，可精准定量大鼠样本中该指标的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.05pg/mL，可精准检测大鼠血清、组织中微量CXCL16表达

检测范围：0.1pg/mL - 60pg/mL，覆盖大鼠生理、炎症病理状态浓度区间

反应时间：全流程110分钟，趋化因子结合反应稳定

保存条件：2-8℃避光保存，酶标板密封防潮，禁止冷冻

有效期：原装有效期12个月，储存稳定

特异性：专一识别大鼠CXCL16，与其他CXC趋化因子、炎症因子无交叉反应

重复性：板内CV≤4%，板间CV≤7%，重复性优异

注意事项：大鼠样本无溶血、无污染，炎症组织低温匀浆；避免样本反复冻融，防止细胞因子失活；洗板彻底，降低背景误差。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒全部试剂室温回温 32min，配制洗涤工作液，大鼠血清 / 组织上清样本离心预处理，酶标板拆分标记分组孔位。

空白孔加样本稀释液，标准孔加入 CXCL16 梯度标准品，样本孔加入稀释后大鼠待测上清液。

一步法加入酶标记检测抗体，封板膜密封微孔板，低速震荡 15 秒混匀。

37℃避光孵育 75min，充分完成固相夹心免疫结合。

去除封板弃废液，洗板 6 次，每孔洗涤浸泡 38s，多次拍干微孔残留洗液。

TMB 显色液避光显色 22min，观察标准品梯度显色效果。

加入终止液混匀终止催化反应，酶标仪检测吸光度，绘制标准曲线计算样本 CXCL16 含量。