人T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒

本试剂盒基于抗原抗体特异性结合与酶促显色放大原理，采用双抗体夹心ELISA法，微孔板固相包被人T细胞活化连接蛋白（LAT）特异性抗体，孵育过程中样本内的LAT抗原与固相抗体结合，洗板去除未结合物质后，加入HRP标记的LAT检测抗体形成免疫复合物，经洗涤去除游离酶标抗体，加入底物液显色，终止反应后测定吸光度，样本中LAT含量越高，显色越深、吸光度值越高，可精准定量检测LAT浓度。
基本参数‌：

产品名称：人T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒

英文名称：LAT ELISA Kit
货号：Y-E2962

规格：48T/96T

1.灵敏度：最低检测浓度≤3.5pg/mL

2.检测范围：7pg/mL - 224pg/mL

3.反应时间：包被孔孵育 65min，二抗 35min，避光显色 16min

4.显色系统：A/B 分体式 TMB 显色液

5.检测波长：450nm

6.特异性：针对人 LAT 全长蛋白，与衔接蛋白家族其他分子无交叉反应

7.重复性：板内变异＜5.8%，板间变异＜9%

8.注意事项：细胞裂解样本需离心去除沉淀，否则易造成孔底浑浊干扰读数
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：

1. 试剂与样本室温平衡 28min，配制洗涤工作液，标准品梯度稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 5min 取上清备用。

2. 划分空白孔、标准品孔、待测样本孔，标准孔加梯度标准品 50μL，样本孔加入上清待测液 50μL，空白孔不添加任何液体。

3. 所有实验组孔加入酶标记二抗工作液 100μL，封板密封，轻摇酶标板使反应体系混匀。

4. 37℃恒温孵育 55min，孵育过程酶标板平放不可倾斜。

5. 弃去孔内液体，洗涤液浸泡每孔 28s 后甩干，连续洗板 4 次，滤纸吸干板孔多余水分。

6. 避光依次加入显色液 A、B 各 50μL，震荡混匀，37℃避光显色 16min。

7. 加入终止液终止酶促显色反应，酶标仪测定吸光值，绘制标准曲线计算样本 LAT 蛋白浓度。
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