人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板预先包被人S100A8特异性单克隆抗体，加入标准品、血清、组织待测样本，样本中的S100钙结合蛋白A8与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入HRP标记的S100A8检测抗体，形成免疫复合物，经TMB显色、终止反应后检测OD值，通过标准曲线定量检测样本中S100A8含量，评估机体炎症反应程度。
基本参数‌：

产品名称：人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒

英文名称：S100A8  Elisa Kit
货号：Y-E539

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测值≤2.0pg/mL，可灵敏检测炎症相关低浓度S100A8蛋白

检测范围：15.6-1000pg/mL，适配炎症、自身免疫疾病、肿瘤相关样本检测

反应时间：标准反应时长2.5h，显色反应快速稳定，读数精准

保存条件：试剂盒整体2-8℃避光保存，显色底物TMB需单独避光存放，严禁冷冻，防止底物失效

有效期：未开封有效期6个月，开盖后试剂1个月内使用完毕

特异性：特异性识别人S100A8蛋白，与S100家族其他亚型蛋白交叉反应率极低，检测特异性高

重复性：板内变异系数＜8%，板间变异系数＜10%，批内批间数据差异小、稳定性好

注意事项：溶血、脂血样本会干扰检测结果，禁止使用；TMB显色液避光操作，接触强光易氧化失效；终止液加入顺序、时间需统一，保证读数一致性；洗板力度均匀，避免孔内残留液体或干孔；仅用于体外科研实验，不适用临床诊断
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 26min，稀释浓缩洗涤液，标准品溶解后梯度稀释分装，酶标板标记分组。

空白孔加稀释液，标准品孔加入梯度标品，待测孔加入待测体液样本，等量精准加样。

一步加入酶结合物工作液，无需弃除孔内液体，封板膜密封酶标板。

37℃避光孵育 57min，孵育箱内无其他杂项试剂干扰。

弃液后洗涤液加满每孔浸泡 27s，重复洗板 4 次，拍干微孔内液体。

加入显色液避光显色 12min，最高浓度孔显色最深。

终止液混匀后上机 450nm 读数，绘制标准曲线计算 S100A8 含量。
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