人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板预先包被抗人mxd1蛋白特异性抗体，加入标准品及待测细胞、组织样本，样本中的MAX二聚化蛋白1与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入HRP标记的mxd1检测抗体，形成夹心免疫复合物，经显色、终止反应后测定OD值，定量分析样本中mxd1蛋白的含量。
基本参数‌：

产品名称：人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒

英文名称：mxd1 ELISA Kit
货号：Y-E2947

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.14ng/mL，适配细胞增殖、肿瘤抑制蛋白检测

检测范围：0.28ng/mL - 17ng/mL，覆盖肿瘤、正常组织表达区间

反应时间：实验总时长93分钟

保存条件：2-8℃冷藏保存，禁止冷冻，防止蛋白失活

有效期：未开封有效期12个月

特异性：特异性结合人mxd1蛋白，与MAX家族其他蛋白无交叉反应

重复性：板内、板间变异系数均＜8%

注意事项：组织、细胞样本充分裂解；避免样本氧化变质影响检测结果
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒所有试剂室温平衡 35min，稀释浓缩洗涤液；mxd1 标准品梯度稀释，细胞裂解上清样本离心除杂。

预包被板各孔加标准品、待测样本 100μL，空白孔补加稀释液。

一步法加入 HRP 标记检测抗体 100μL，轻柔震荡混匀封板。

37℃孵育 70min。

洗板 5 次，每孔洗液浸泡 40s 后拍干。

显色体系避光显色 19min。

终止液终止反应，酶标仪读数，依据标准曲线计算 mxd1 蛋白含量。
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