人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理，酶标板微孔固定抗人Flt-3L单克隆抗体，加入待测样本与标准品，样本中的Flt3配体抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记的对应检测抗体，形成夹心免疫复合物，通过底物显色、终止反应及吸光度检测，结合标准曲线定量分析样本中Flt-3L的浓度。
基本参数‌：

产品名称：人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)ELISA试剂盒

英文名称：Flt-3L Elisa Kit
货号：Y-E3123

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.07ng/mL，可检测微量细胞因子配体蛋白

检测范围：0.14ng/mL - 25ng/mL，适配造血调控、免疫相关样本检测

反应时间：全流程实验时长100分钟

保存条件：2-8℃避光保存，试剂开封后短期用完，避免活性衰减

有效期：标准储存条件下12个月

特异性：专一识别Flt-3L配体蛋白，无同源细胞因子交叉反应

重复性：板内变异＜7%，板间变异＜9%

注意事项：细胞上清样本需离心除菌；全程无热源操作，防止蛋白降解
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂室温放置 28min，配制洗涤工作液；Flt-3L 标准品复溶稀释成系列浓度，待测生物样本预处理离心。

酶标板各孔加样 100μL，标准孔、样本孔分别加对应液体，空白孔加稀释液。

全部孔加入酶结合抗体液 100μL，震荡混匀后封板。

37℃恒温孵育 52min。

洗板 4 次，洗涤液浸润 30s 后拍干微孔。

TMB 显色液避光反应 13min。

终止反应后酶标仪检测吸光值，依据标准曲线计算配体含量。
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