大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶免疫吸附检测原理，将大鼠组织多肽抗原（TPA）特异性抗体固定于酶标板微孔表面，样本和标准品中的TPA抗原可与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入酶标记特异性抗体形成双层抗体夹心复合物，经酶促底物显色反应产生有色产物，显色强度与样本中TPA抗原含量呈正相关，通过检测吸光度并对照标准曲线，即可定量检测大鼠样本中TPA的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测值0.3U/L，可精准捕捉大鼠血清、组织液中微量TPA肿瘤标志物。

检测范围：0.5U/L - 120U/L，覆盖大鼠正常及病理状态下TPA表达浓度梯度。

反应时间：标准实验时长85分钟，37℃温育两步反应，抗原抗体结合35分钟，显色反应15分钟。

保存条件：试剂盒2-8℃冷藏保存，酶标板拆封后需密封防潮，禁止室温长期放置。

有效期：正规储存条件下有效期12个月，批次稳定性统一，无短期活性衰减问题。

特异性：专一结合大鼠TPA抗原，与多肽类同源抗原、肿瘤相关标志物无交叉反应。

重复性：板内变异系数≤6.5%，板间变异系数≤8.5%，满足科研定量检测标准。

注意事项：样本采集后需离心取上清，浑浊样本需过滤处理；终止液加入后需10分钟内完成读数，避免数值漂移。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒组分室温放置 20min，配置工作洗涤液，拆分酶标板条，未使用板条密封后 2-8℃存放。

标准品系列稀释制备梯度浓度液，待测样本预处理离心澄清，每孔加入 55μL 标准液或待测样本。

直接向除空白孔外所有孔加入酶结合物工作液 110μL，封板膜紧密封板。

37℃隔水式恒温孵育 55min，完成一步法夹心免疫结合反应。

弃液洗板，每孔灌满洗涤液静置 25s，甩干拍板，循环洗板 6 次，去除非特异性吸附杂质。

每孔分别滴加显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 12min，观察孔内蓝色梯度显色。

加入终止液终止反应，酶标仪 450nm 测 OD 值，依据标准曲线定量 TPA 抗原浓度。