大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔预先包被纯化的大鼠histon-H2b特异性捕获抗体。实验孵育阶段，样本、标准品中的大鼠组蛋白H2b抗原与固相抗体特异性结合，洗涤清除未结合杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的histon-H2b检测抗体，形成稳定的免疫夹心复合物。经TMB底物显色、终止液终止反应后，吸光度值与样本中组蛋白H2b含量呈正相关，结合标准曲线可精准完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.2ng/mL

检测范围：0.5ng/mL - 80ng/mL

反应时间：总反应130分钟（37℃孵育70min、酶反应30min、显色30min）

保存条件：2-8℃密封避光保存，组蛋白试剂严禁冻融

有效期：12个月

检测波长：450nm/630nm双波长校正

标准曲线绘制：梯度标准品OD值拟合曲线，R²≥0.991

注意事项：组织样本需充分裂解，提取完整组蛋白，避免蛋白降解影响检测结果
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

1. 浓缩洗涤液稀释配比，试剂室温回温 32min，细胞上清样本去除细胞沉淀杂质，拆取所需酶标条进行实验。

2. 标准品孔梯度上样 50μL 组蛋白 H2b 标准品，样本孔加入 50μL 待测样本，空白孔补稀释液。

3. 全部孔位加入酶标记抗体工作液 100μL，封板密封，37℃恒温孵育 61min。

4. 洗板 6 次，洗涤液浸泡 35s 每一轮，甩干废液并拍干微孔残留水分。

5. 避光加入显色液 A、B 各 50μL，轻微震荡混匀，37℃避光显色 18min。

6. 滴加终止液 50μL 混匀终止酶促反应。

7. 450nm 波长测定 OD 值，对照标准曲线计算 histon-H2b 浓度。