大鼠轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将大鼠Ntn1特异性抗体包被于酶标板微孔表面。孵育阶段，样本、标准品中的大鼠Ntn1抗原与固相抗体特异性结合，洗涤清除未结合组分后，加入HRP标记的Ntn1检测抗体，构建稳定的特异性免疫复合物。通过TMB底物显色反应产生特征性有色产物，产物吸光度与样本中Ntn1含量成正比，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线即可完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.4ng/mL

检测范围：0.8ng/mL - 120ng/mL

反应时间：总反应120分钟（37℃孵育60min、酶孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃密封避光保存，核心试剂防冻

有效期：12个月

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数Logistic拟合，R²≥0.990

注意事项：神经组织样本需充分匀浆离心，去除杂质后检测
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

1. 所有试剂室温静置 30min，配比稀释洗涤液，脑组织匀浆样本离心取上清，拆分酶标板预留实验用孔。

2. 标准品孔加入梯度 Ntn1 标准品 50μL，样本孔加入 50μL 上清待测液，空白孔补稀释液。

3. 各孔加入酶偶联抗体液 100μL，封板封口，37℃孵育 54min。

4. 洗板 6 轮，每轮加满洗涤液浸泡 30s，倒扣甩干微孔液体。

5. 避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 14min。

6. 滴加终止液 50μL 混匀终止酶促反应。

7. 450nm 读取 OD 值，绘制标准曲线测定 Ntn1 浓度。