大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定有高特异性大鼠TRAIL-R3捕获抗体。检测过程中，待测样本和标准品中的TRAIL-R3抗原与固相抗体特异性结合，洗板清除游离杂质与未结合蛋白后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成稳定夹心免疫结构。经TMB底物显色、酸性终止液终止反应后，微孔溶液吸光度值与样本中TRAIL-R3含量呈正相关，结合标准曲线可精准完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤3.0pg/mL

检测范围：6pg/mL - 220pg/mL

反应时间：总反应120分钟（37℃恒温孵育60min、酶反应30min、显色30min）

保存条件：2-8℃密封避光保存，试剂组分单独存放

有效期：12个月

检测波长：450nm/630nm双波长检测

标准曲线绘制：六梯度标准品拟合曲线，R²≥0.991

注意事项：实验全程无菌操作，避免微生物污染试剂
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

1. 浓缩洗涤液稀释配比，试剂室温复温 26min，待测血清样本解冻混匀离心，划分酶标板实验孔。

2. 标准品孔上样 50μL 梯度标准品，样本孔加入 50μL 待测样本，空白对照孔补稀释液。

3. 各孔加入酶抗体工作液 100μL，封板封口，37℃恒温孵育 70min。

4. 洗板 4 次，洗涤液浸泡 40s 每次，甩干后吸水纸吸干残留液体。

5. 避光加显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 15min。

6. 滴加终止液 50μL 混匀终止显色。

7. 450nm 测 OD 值，计算 TRAIL-R3 浓度。