大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板固相微孔固定有纯化的大鼠TNFsR-Ⅱ特异性捕获抗体。检测孵育时，待测样本与梯度标准品中的TNFsR-Ⅱ抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除杂质后，加入酶标记的TNFsR-Ⅱ检测抗体进行孵育结合。经TMB底物显色、终止液终止反应后，吸光度值与样本中TNFsR-Ⅱ浓度呈正相关，通过标准曲线计算可精准测定大鼠样本中该可溶性受体的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤5.0pg/mL

检测范围：10pg/mL - 350pg/mL

反应时间：总反应130分钟（37℃孵育70min、酶反应30min、显色30min）

保存条件：2-8℃密封避光保存，开封试剂1个月内用完

有效期：12个月

检测波长：450nm/630nm双波长校正

标准曲线绘制：梯度标准品OD值拟合曲线，R²≥0.991

注意事项：样本稀释比例需精准，避免浓度超出检测范围导致结果失真
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

1. 试剂室温平衡 35min，稀释洗涤液，避免样本溶血与反复冻融，标记酶标板空白、标准、样本孔。

2. 标准品孔加入不同浓度标准品 50μL，待测样本孔上样 50μL 样本，空白孔添加稀释液。

3. 各孔加入酶偶联工作液 100μL，封板膜密封，37℃孵育 64min。

4. 洗板 5 次，洗涤液浸泡 35s / 次，甩干后吸干板孔水分。

5. 避光加显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡，37℃避光显色 18min。

6. 加入终止液 50μL 混匀终止显色。

7. 450nm 读取 OD 值，计算 TNFsR-Ⅱ 浓度。