大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒

本试剂盒以双抗体夹心酶联免疫吸附技术为核心，酶标板微孔预先包被大鼠TNFsR-Ⅰ特异性抗体。孵育过程中，样本、标准品中的大鼠TNFsR-Ⅰ抗原与固相抗体特异性结合，洗涤清除未结合物质后，加入HRP标记的TNFsR-Ⅰ检测抗体，形成稳定的免疫夹心复合物。通过TMB底物显色反应生成有色产物，产物吸光度大小对应样本中TNFsR-Ⅰ的含量高低，终止反应后检测吸光度，依据标准曲线即可完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤5.0pg/mL

检测范围：10pg/mL - 300pg/mL

反应时间：总反应130分钟（孵育70min、酶孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃冷藏避光，禁止冻融试剂

有效期：12个月

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，R²≥0.990

注意事项：洗板力度均匀，避免孔内残留液体，防止背景值偏高
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

1. 浓缩洗涤液稀释为工作液，所有试剂室温静置 30min，待测样本预处理离心取上清，酶标板按需取用。

2. 标准品孔梯度加样 50μL TNFsR-Ⅰ 标准品，样本孔加入 50μL 待测液，空白孔补加稀释缓冲液。

3. 每孔加入酶标记抗体工作液 100μL，封板封口，37℃温育 56min。

4. 弃液后洗板 6 次，每次浸泡 30s，彻底拍干微孔内液体。

5. 避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 14min。

6. 滴加终止液 50μL，充分混匀终止反应。

7. 450nm 测定吸光度，标准曲线计算受体 Ⅰ 含量。