大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，在酶标板微孔内固定大鼠TNF-β特异性捕获抗体。实验中，待测样本和标准品中的大鼠TNF-β抗原可与固相抗体发生特异性免疫结合，洗板去除游离成分后，加入辣根过氧化物酶标记的TNF-β检测抗体，完成二次特异性结合。经TMB底物酶促显色、终止反应后，溶液吸光度与样本中TNF-β浓度呈正向相关，结合标准曲线可精准定量大鼠样本中肿瘤坏死因子β的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤2.0pg/mL

检测范围：10pg/mL - 250pg/mL

反应时间：总反应120分钟（37℃孵育60min、酶反应30min、显色30min）

保存条件：2-8℃密封避光保存，试剂分类存放

有效期：12个月

检测波长：450nm/630nm双波长检测

标准曲线绘制：六梯度标准品拟合曲线，R²≥0.991

注意事项：样本需新鲜制备，长时间放置会导致因子降解，影响检测结果
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

1. 试剂盒试剂室温回温 28min，配制洗涤工作液，待测上清样本离心去除杂质，拆分酶标板备用。

2. 标准品孔加入系列浓度 TNF-β 标准品 50μL，样品孔上样 50μL 待测样本，空白对照孔添加稀释液。

3. 全部孔加入酶结合液 100μL，封板密封，震荡混匀，37℃孵育 66min。

4. 洗板 4 次，每次洗涤液浸泡 40s，倾倒废液后吸水纸拍干。

5. 避光添加显色液 A、B 各 50μL，37℃避光显色 16min。

6. 加入终止液 50μL / 孔，摇晃混匀终止显色。

7. 酶标仪 450nm 读数，换算 TNF-β 样本浓度。