大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒

本试剂盒采用成熟的双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔内固定有纯化的大鼠NE特异性捕获抗体。孵育时，待测样本、梯度标准品中的大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶可与固相抗体特异性结合，洗板清除未结合杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的NE检测抗体，完成特异性免疫结合。经TMB底物显色、终止液终止反应后，吸光度数值与样本中NE含量呈正相关，依据标准曲线可精准定量大鼠样本中NE的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.2ng/mL

检测范围：0.4ng/mL - 60ng/mL

反应时间：总反应130分钟（样本孵育70min、酶反应30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光冷藏，禁止冷冻，避免酶蛋白失活

有效期：12个月

检测波长：450nm/630nm双波长检测

标准曲线绘制：六梯度标准品拟合曲线，R²≥0.992

注意事项：样本避免溶血、炎症杂质污染，洗板需彻底，减少非特异性吸附
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

1. 所有试剂室温放置 25min，稀释洗涤液，待测样本避免溶血，拆分酶标板预留实验孔，剩余密封冷藏。

2. 标准品孔加入不同浓度 NE 标准品 50μL，样本孔加 50μL 待测样本，空白孔加入稀释液 50μL。

3. 每孔加入酶结合工作液 100μL，封板封口，震荡混匀，37℃孵育 62min。

4. 弃液洗板 5 次，每次洗涤液浸泡 35s 后甩干，最后拍干微孔。

5. 避光加显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 13min。

6. 每孔加入终止液 50μL，充分混匀终止反应。

7. 450nm 波长读数，计算样本中性粒细胞弹性蛋白酶浓度。