人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争抑制ELISA检测原理，微孔板预先包被3-硝基酪氨酸人工抗原，检测体系中加入标准品、待测样本和定量的3-NT特异性抗体，样本中的3-NT抗原与板上固相抗原竞争结合有限的抗体结合位点，孵育反应后洗涤去除未结合反应物，加入酶标记二抗进行结合反应，再次洗涤后加入TMB底物显色，样本中3-NT含量越高，竞争结合的抗体越多，板上结合的抗体越少，显色越浅，即吸光度值与3-NT浓度呈负相关，通过标准曲线拟合即可定量检测样本中3-硝基酪氨酸的含量。
基本参数‌：

产品名称：人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒

英文名称：3-NT  Elisa Kit
货号：Y-E764

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.1nmol/L，精准检测氧化应激微量标志物

检测范围：0.3nmol/L - 9nmol/L，适配氧化损伤相关样本检测

反应时间：完整反应时长90分钟，快速完成样本检测，适配批量实验

保存条件：试剂盒整体2-8℃避光冷藏，严禁冷冻，防止小分子标志物试剂失效

有效期：原装有效期6个月，开封后1个月内用完，避免试剂氧化失效

特异性：特异性结合3-硝基酪氨酸，与酪氨酸、硝基化其他氨基酸无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9.5%，检测数据波动小

注意事项：样本采集后需快速低温保存，避免体外氧化生成干扰物质；实验全程避光操作，洗板彻底，保证检测准确性
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

样本处理：血浆样本室温融化，溶血样本舍弃不用，常规样本直接稀释 1:4 备用；标准品复溶后逐级稀释 6 个浓度梯度。

加样布设：空白孔加稀释液 50μL，各标准孔加入对应浓度标准品 50μL，样本孔加入稀释后待测样品 50μL。

一步共加酶试剂：全部反应孔加入酶标记竞争抗原工作液 100μL，封板封口，摇匀板面。

孵育结合：37℃避光孵育 65min，完成竞争免疫结合反应。

洗板操作：倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 30s，洗板 4 次，吸水纸吸干孔内水分。

底物显色：加入显色混合液 100μL，37℃避光显色 14min。

终止检测：终止液终止反应，450nm 波长测定吸光度，换算样本 3-NT 含量。
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