大鼠凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板包被大鼠TR特异性捕获抗体，待测大鼠样本中的TR抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗除游离物质后加入酶标二抗形成免疫复合物，经底物显色、吸光度检测，对照标准曲线即可定量测定样本中TR的浓度水平。
基本参数‌：

产品名称：大鼠凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒

英文名称：TR ELISA Kit
货号：Y-E1312

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.08ng/mL，可精准检测大鼠血小板、组织中凝血酶受体微量表达。

检测范围：0.1ng/mL - 18ng/mL，适配大鼠凝血功能、血管内皮损伤样本检测。

反应时间：总实验时长95分钟，样本孵育30min、酶孵育30min、显色20min、终止15min。

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，抗体试剂密封避光，禁止低温冷冻。

有效期：原装试剂盒有效期6个月，开封后1个月内用完。

显色系统：稳定型TMB显色体系，显色梯度清晰，无背景杂色干扰。

检测波长：450nm检测波长，600nm校正波长，提升检测准确度。

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，R²≥0.992，定量精准度高。

特异性：专一识别大鼠凝血酶受体(TR)，与其他G蛋白偶联受体无交叉反应。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，重复性良好。

注意事项：血小板样本轻柔处理，避免受体蛋白破坏；孵育温度严格恒定37℃。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

包被微孔板各孔添加梯度标准品 52μL，血管内皮样本 52μL，标注组别孔号。

直接加入酶标记检测液 99μL，封板孵育，37℃恒温反应 55min。

废液倾倒干净，洗涤液浸泡 34s，拍干残留液体，洗板 4 次。

避光添加显色 AB 液各 50μL，混匀室温显色 18min。

每孔滴入终止液 50μL 终止显色，晃动微孔板混匀体系。

酶标仪 450nm 测定原始吸光度数据。

计算凝血酶受体表达量，分析凝血信号通路受体水平。
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