大鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔固定抗大鼠ADAM9特异性捕获抗体，可特异性捕获样本中的ADAM9抗原分子。通过样本孵育、特异性结合、洗板除杂、酶标抗体结合后，加入底物显色液产生显色反应，显色深浅与ADAM9蛋白含量成正比。通过检测吸光度并对照标准曲线，可定量测定大鼠样本中ADAM9的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度0.1ng/mL，可精准检测组织、血清中低丰度ADAM9蛋白。

检测范围：0.2ng/mL - 10ng/mL，适用于大鼠肿瘤组织、炎症组织、血清及细胞上清样本。

反应时间：全流程90分钟，温育60分钟，底物显色15分钟，反应条件稳定。

保存条件：试剂盒组分2-8℃避光保存，洗涤液室温密封存放，避免高温。

有效期：原装未拆封有效期6个月，开封后试剂30天内使用完毕。

显色系统：经典TMB显色系统，HRP酶催化反应，显色均匀、稳定性强。

检测波长：450nm检测波长，630nm参比校正。

标准曲线绘制：梯度标准品取值，四参数Logistic拟合曲线，R²≥0.991。

特异性：特异性识别大鼠ADAM9，与其他ADAM家族成员无明显交叉反应。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，实验数据一致性良好。

注意事项：肿瘤组织样本需充分匀浆离心；实验全程避光温育；标准品现配现用，避免降解失效。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 32min，稀释浓缩洗涤液，复溶 ADAM9 标准品并做梯度稀释，固定酶标板使用条数。

空白孔加稀释液，标准孔加梯度浓度标准品 50μL，待测样本孔加入稀释后生物样本 50μL。

全部孔位添加酶标记抗体工作液 100μL，覆膜密封，37℃孵育 67min。

洗板 5 次，洗液浸泡 32s 每轮，甩干液体并吸水纸拍干板条。

避光添加显色 A、B 底物各 50μL，37℃避光显色 17min。

加入终止液 50μL 终止酶促反应，轻晃混匀。

酶标仪 450nm 读数，计算 ADAM9 浓度。