大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，固相酶标板包被大鼠ADAM8特异性抗体，能够特异性识别并结合样本中的解整合素样金属蛋白酶8抗原。孵育结合充分后洗板，去除游离杂质，加入HRP标记的检测抗体形成免疫夹心复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度。依据标准曲线的线性关系，可精准定量大鼠样本中ADAM8的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测下限0.1ng/mL，可精准检测炎症组织中微量ADAM8蛋白酶含量。

检测范围：0.2ng/mL - 9ng/mL，适配大鼠炎症组织、血清、免疫细胞上清样本。

反应时间：全流程90分钟，样本温育60分钟，显色15分钟，实验流程简洁高效。

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，液体试剂禁止冷冻，冻干粉标准品干燥密封。

有效期：未开封试剂盒有效期6个月，开封后1个月内使用完毕。

显色系统：TMB-HRP显色体系，酶促反应特异性高，显色梯度清晰。

检测波长：450nm标准检测波长，适配各类酶标仪设备。

标准曲线绘制：浓度梯度与OD值四参数拟合，标准曲线R²≥0.990。

特异性：特异性结合大鼠ADAM8，与ADAM9、ADAM10等同家族蛋白酶无交叉反应。

重复性：板内变异系数≤8%，板间变异系数≤10%，重复性达标。

注意事项：炎症样本需去除杂质、细菌沉淀；样本避免反复冻融，防止蛋白酶失活；实验耗材无酶无污染。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂常温回温 26min，配比洗涤工作液，梯度稀释 ADAM8 标准品，拆分酶标板条备用。

标品孔依次加梯度标品 50μL，样本孔上样 50μL 预处理样本，空白孔补稀释缓冲液。

每孔加入酶结合试剂 100μL，封板 37℃孵育 55min。

洗板 4 次，浸泡 25s 每次，弃液后彻底拍干微孔残留液体。

避光加入显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 13min。

滴加终止液 50μL 混匀终止显色。

450nm 测定 OD 值，换算 ADAM8 样本含量。