大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将大鼠TAT特异性抗体包被于酶标板，加入待测大鼠样本及梯度标准品，样本中的TAT复合物抗原与固相抗体结合，加入酶标记检测抗体构建免疫夹心结构，显色终止后，根据吸光度和标准曲线精准定量TAT含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒

英文名称：TAT ELISA Kit
货号：Y-E1310

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测下限≤0.1ng/mL，可精准检出大鼠血浆中微量TAT复合物含量。

检测范围：0.2ng/mL - 25ng/mL，覆盖大鼠血栓、凝血功能紊乱模型检测区间。

反应时间：全程实验110分钟，样本孵育40min、酶孵育30min、显色25min、终止15min。

保存条件：2-8℃避光冷藏，血浆样本配套试剂单独存放，严禁冷冻。

有效期：未开封试剂盒有效期6个月，规范存放性能稳定。

显色系统：专用TMB显色体系，针对凝血复合物检测优化，显色特异性强。

检测波长：450nm主波长，630nm参比波长，校正微孔板背景误差。

标准曲线绘制：四参数Logistic拟合曲线，R²≥0.990，精准定量TAT复合物浓度。

特异性：特异性识别大鼠TAT复合物，不与单独凝血酶、抗凝血酶交叉反应。

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%，实验重复性达标。

注意事项：必须使用新鲜抗凝血浆样本，避免凝血失效；全程无热源、无凝血污染操作。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

微孔板每孔加入标准品稀释液 48μL，大鼠血浆待测样本 48μL，严格避免凝血激活污染。

每孔加入酶标二抗试剂 102μL，封板避光，37℃孵育 69min。

弃净孔内液体，洗涤液浸泡 30s，拍干，循环洗板 5 次。

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后暗处显色 16min。

加入终止液 50μL 终止酶促反应，横向摇晃微孔板混匀。

酶标仪 450nm 读取 OD 值，全程样本低温处理。

曲线换算 TAT 复合物浓度，判定机体凝血激活状态。
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