大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将大鼠uPA特异性抗体包被于酶标板，样本与标准品中的uPA抗原与固相抗体结合，加入酶标记检测抗体构建夹心免疫结构，经洗板、显色、读数后，通过标准曲线定量测定大鼠样本中uPA的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒

英文名称：uPA ELISA Kit
货号：Y-E1536

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测下限≤0.07ng/mL，可精准检出大鼠组织、血清中低丰度uPA蛋白。

检测范围：0.1ng/mL - 18ng/mL，覆盖大鼠肿瘤、血栓模型样本uPA常规表达区间。

反应时间：全程实验90分钟，样本孵育30min、酶标孵育30min、显色15min、终止稳定15min。

保存条件：试剂盒2-8℃避光冷藏，微孔板开封后密封防潮，禁止冷冻所有试剂。

有效期：未开封有效期6个月，开封后试剂1个月内用完。

显色系统：高灵敏TMB显色体系，显色稳定，背景值极低，适合微量蛋白检测。

检测波长：450nm主波长，630nm参比波长，双波长校正误差。

标准曲线绘制：四参数Logistic回归拟合，标准曲线R²≥0.993，定量精度高。

特异性：特异性结合大鼠uPA，与tPA（组织型纤溶酶原激活物）无交叉反应。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，重复实验数据一致性优异。

注意事项：避免溶血样本，溶血成分会干扰抗原抗体结合；显色反应严格避光，超时显色会导致结果偏高。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

包被微孔板各孔添加梯度标准品 51μL，组织上清待测样本 51μL，区分孔位。

每孔加入酶标检测液 98μL，封板避光，37℃孵育 67min。

弃去废液，洗涤液浸泡 29s，拍干，洗板 5 轮。

避光添加显色底物 A、B 各 50μL，混匀暗处显色 13min。

终止液 50μL 滴加至每孔，终止反应并横向混匀微孔板。

板底擦干水渍后酶标仪 450nm 读取 OD 数值。

计算 uPA 蛋白含量，分析纤溶激活通路水平。
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