大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔预先包被大鼠UK特异性抗体，加入待测大鼠样本及梯度标准品，样本中的UK抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板后加入酶标二抗形成稳定复合物，催化底物显色，根据吸光度数值和标准曲线定量检测UK浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒

英文名称：UK ELISA Kit
货号：Y-E1103

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.1IU/L，可精准检测大鼠体液、组织中微量尿激酶活性含量。

检测范围：0.2IU/L - 25IU/L，适配大鼠纤溶系统相关样本的UK定量检测。

反应时间：总实验时长105分钟，样本孵育35min、酶孵育35min、显色20min、终止读数15min。

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，洗涤液可常温存放，酶结合物必须低温避光保存。

有效期：原装试剂盒有效期6个月，规范存放性能稳定无衰减。

显色系统：HRP标记-TMB显色体系，反应特异性强，显色梯度分明，无假性显色。

检测波长：450nm标准检测波长，630nm校正波长，降低系统误差。

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，R²≥0.990，满足精准定量检测要求。

特异性：特异性识别大鼠尿激酶(UK)，与纤溶酶、链激酶无交叉反应。

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%，批次重复性良好。

注意事项：样本采集后避免反复冻融，防止尿激酶活性丧失；实验耗材无蛋白酶污染，避免样本降解。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

微孔板每孔加入标准品稀释液 47μL，大鼠尿液 / 血浆样本 47μL，设置空白孔。

HRP 标记抗体液 103μL 加入所有孔，覆膜封板，37℃孵育 64min。

洗涤液注满微孔静置 23s，弃液拍干，洗板 4 次。

避光加入显色 AB 液各 50μL，轻微摇晃微孔板，显色 15min。

终止液 50μL 每孔添加，终止显色反应并混匀液体。

酶标仪 450nm 检测吸光度，扣除空白本底。

标准曲线换算尿激酶浓度，评价纤溶系统活性。
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