大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争法ELISA检测原理，本试剂盒将纯化的大鼠GC抗原包被于酶标板，待测样本中的内源性GC与固相GC抗原竞争结合限量的酶标记特异性抗体，样本中GC含量越高，结合在固相上的酶标抗体越少，底物显色越浅，通过检测吸光度数值，结合竞争法标准曲线，定量检测大鼠样本中GC的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒

英文名称：GC ELISA Kit
货号：Y-E1059

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测值≤0.3ng/mL，可精准检出大鼠体内微量内源性糖皮质激素基础表达水平。

检测范围：0.5ng/mL - 50ng/mL，覆盖大鼠生理、病理状态下GC的浓度波动范围。

反应时间：总实验时长110分钟，样本孵育40分钟，酶标抗体孵育30分钟，显色25分钟，终止读数15分钟。

保存条件：试剂盒2-8℃避光保存，标准品、浓缩抗体需单独密封存放，禁止冷冻，防止蛋白变性失活。

有效期：未开封试剂盒有效期6个月，恒温恒湿条件下存放性能稳定。

显色系统：优化型TMB双组分显色体系，显色反应温和稳定，不易过曝，高低浓度显色梯度分明。

检测波长：标准检测波长450nm，参比波长630nm，双波长校正提升微量样本检测准确率。

标准曲线绘制：采用四参数Logistic回归拟合标准曲线，R²≥0.990，适配高低浓度样本精准定量。

特异性：特异性结合大鼠GC，与皮质醇、醛固酮等其他甾体激素无明显交叉反应，检测特异性达标。

重复性：板内变异系数≤8%，板间变异系数≤10%，批次检测重复性良好。

注意事项：样本采集后尽快分离上清，避免激素降解；实验全程避光操作，防止显色试剂氧化；严格把控孵育温度，偏差不超过±1℃。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

无激素污染微孔板每孔加梯度标准品 48μL，大鼠血清样本 48μL，空白对照孔设稀释液。

每孔加入特异性酶标二抗 101μL，封板避光，37℃孵育 68min。

弃净孔内液体，洗涤液浸泡 32s，拍干，循环洗板 5 次。

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后暗处显色 14min。

加入终止液 50μL 终止酶促反应，横向摇晃微孔板混匀。

酶标仪 450nm 读取 OD 值，避免激素交叉干扰。

曲线换算糖皮质激素浓度，判定机体内源激素分泌水平。
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