大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定抗大鼠EL特异性抗体，加入待测大鼠样本和梯度标准品，样本中的EL抗原与固相抗体特异性结合，洗涤后加入酶标检测抗体形成夹心结构，显色终止后检测吸光度，结合标准曲线定量测定EL含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒

英文名称：EL ELISA Kit
货号：Y-E1377

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度小于0.05U/L，能够精准检测大鼠样本中低丰度内皮脂肪酶活性。

检测范围：0.1U/L - 20U/L，适配大鼠血清、血浆、组织裂解液中EL活性常规检测需求。

反应时间：全程实验时长100分钟，样本结合孵育35分钟，酶结合物孵育30分钟，显色20分钟，终止平衡15分钟。

保存条件：全套试剂2-8℃避光冷藏保存，浓缩洗涤液低温可能结晶，使用前温水溶解摇匀即可，禁止高温存放。

有效期：原装未拆封试剂盒有效期6个月，开封后试剂1个月内用完，避免活性衰减。

显色系统：TMB特异性显色体系，HRP酶促显色反应，显色均匀，梯度区分度高，无非特异性显色。

检测波长：检测主波长450nm，辅助校正波长600nm，有效消除微孔板背景干扰。

标准曲线绘制：基于梯度标准品OD值拟合四参数曲线，标准曲线R²≥0.992，浓度计算精准度高。

特异性：专一识别大鼠内皮脂肪酶(EL)，与脂蛋白脂酶、肝脂肪酶等同类脂肪酶无交叉反应，特异性极强。

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%，多次重复检测数据偏差小，实验稳定性优异。

注意事项：血浆样本需选用EDTA抗凝剂，避免肝素抗凝影响酶活性；孵育过程严格密封，防止孔内液体蒸发；试剂摇匀操作轻柔，避免产生气泡。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：

微孔板分孔上样标准品溶液 53μL，血管组织匀浆样本 53μL，标注孔号。

加入 HRP 酶标记抗体液 97μL，覆膜封板，37℃孵育 57min。

倾倒废液，洗涤液浸泡 28s，拍干水分，洗板 4 次。

避光滴加显色 AB 液各 50μL，轻微震动板体，显色 19min。

终止液 50μL 每孔添加，终止显色并混匀液体。

清洁板底后酶标仪 450nm 检测吸光度。

标准曲线计算 EL 酶含量，分析脂代谢内皮酶活性相关蛋白。
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