大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测技术，酶标板固相包被大鼠降钙素（CT）特异性捕获抗体，用于特异性结合待测样本中的CT抗原。经过孵育结合、洗板净化、酶标抗体结合、底物显色反应后，体系吸光度值与样本中降钙素含量呈正相关。通过拟合标准曲线，可精准定量检测大鼠血清、组织样本中CT的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤1.0pg/mL

检测范围：2pg/mL - 150pg/mL

反应时间：总反应时长115min（孵育85min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光保存，多肽激素试剂密封防潮

有效期：12个月（未开封）

显色系统：低背景高灵敏TMB显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：7点梯度标准品检测，四参数拟合精准曲线

特异性：特异性结合大鼠降钙素，与其他钙调节激素无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：样本采集后低温保存，降钙素稳定性差，易降解
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 32min，配比洗涤工作液，稀释 CT 标准品，拆分酶标板所需条带。

标品孔加入梯度浓度标准品 50μL，大鼠血清样本孔加稀释后样本 50μL，空白孔加稀释缓冲液。

每孔添加酶标记抗体 100μL，封板膜封闭，37℃孵育 65min。

洗板 5 次，浸泡 32s 每轮，弃净液体后吸水纸拍干板条。

避光加入显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 16min。

滴入终止液 50μL 混匀终止反应。

酶标仪 450nm 检测，得出降钙素 CT 浓度。