大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理，固相载体包被大鼠ES特异性抗体，样本及标准品中的ES抗原与抗体特异性免疫结合，加入酶标记二抗后形成免疫复合物，催化底物显色，颜色深浅对应ES含量，通过吸光度读数及标准曲线换算实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒

英文名称：ES ELISA Kit
货号：Y-E1448

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度小于0.1ng/mL，可精准捕捉样本中微量ES表达差异，无交叉干扰检测下限。

检测范围：0.15ng/mL - 10ng/mL，覆盖大鼠血清、组织匀浆、细胞上清液中ES常规表达浓度区间。

反应时间：整体实验操作耗时90分钟，包括样本孵育30分钟、酶标孵育30分钟、显色反应15分钟、终止稳定15分钟。

保存条件：试剂盒未开封状态2-8℃冷藏保存，严禁冷冻；开封后板条密封避光2-8℃存放，避免受潮污染。

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月，严格按保存条件存放可保证全程性能稳定。

显色系统：采用TMB单组分显色液，过氧化物酶催化特异性显色，底色干净、显色梯度清晰，无杂色干扰。

检测波长：主检测波长450nm，参比波长630nm，双波长校正降低孔底杂质、气泡带来的检测误差。

标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，采用四参数Logistic拟合方程绘制标准曲线，拟合度R²≥0.990。

特异性：仅特异性识别大鼠内皮抑素(ES)，与大鼠其他同源细胞因子、血管调控因子无交叉反应，特异性准确率100%。

重复性：板内变异系数CV≤8%，板间变异系数CV≤10%，批次间检测数据稳定性高、重复性良好。

注意事项：实验所有试剂需提前平衡至室温（20-25℃）；避免试剂交叉污染，枪头、孵育耗材一次性使用；显色反应需严格避光，终止后15分钟内完成上机检测。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

包被微孔板各孔添加梯度标准品 50μL，大鼠血清样本 50μL，空白孔补稀释缓冲液。

每孔加入酶结合检测液 100μL，封板膜封闭，37℃孵育 60min。

洗板液加满微孔静置 25s，弃液拍干，重复洗涤 5 次。

避光依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，混匀后避光显色 15min。

每孔加入终止液 50μL 终止反应，晃动微孔板混匀体系。

酶标仪 450nm 读取 OD 数值，剔除异常孔读数。

换算内皮抑素浓度，检测血管抑制因子水平。
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