大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将大鼠eNOS特异性抗体包被于酶标板表面，加入标准品和待测大鼠样本，样本内eNOS抗原与固相抗体特异性结合，后续结合酶标记抗体形成免疫复合物，显色检测后通过标准曲线精准测定eNOS的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒

英文名称：eNOS ELISA Kit
货号：Y-E1342

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.08ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 9ng/mL

反应时间：总反应时长125min

保存条件：2-8℃避光密封保存，酶蛋白试剂禁止冻融

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：酶蛋白专用TMB显色体系

检测波长：450nm波长检测

标准曲线绘制：6梯度标准品拟合曲线，R²≥0.995

特异性：特异性结合大鼠eNOS，与iNOS、nNOS无交叉反应

重复性：板内CV＜8%，板间CV＜10%

注意事项：组织样本低温匀浆，保持酶活性；无氧化污染，避免酶失活；洗涤彻底，减少非特异性吸附
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

预包被板每孔加梯度标准品 51μL，血管内皮裂解样本 51μL，做好标记。

直接加入酶标记检测试剂 98μL，封板避光，37℃孵育 64min。

排空孔内液体，洗涤液浸泡 30s，拍干，洗板 5 轮。

避光添加显色底物 A、B 各 50μL，混匀后室温显色 13min。

终止液 50μL 每孔滴加，终止反应并横向混匀微孔板。

板底除水渍后酶标仪 450nm 检测 OD 值。

计算 eNOS 蛋白浓度，评估内皮一氧化氮合成能力。
公司正在出售的产品：