大鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，固相酶标板包被大鼠FS特异性捕获抗体，加入梯度标准品和待测大鼠样本，样本中FS抗原与固相抗体特异性结合，洗除游离物质后加入酶标检测抗体，形成稳定夹心复合物，底物显色后检测吸光度，依据标准曲线定量测定样本中FS的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒

英文名称：FS ELISA Kit
货号：Y-E1286

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL

检测范围：0.3ng/mL - 15ng/mL

反应时间：总反应时长130min

保存条件：2-8℃避光保存，所有试剂禁止冷冻，开封后1个月内用完

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：TMB稳定显色体系，底色干净、显色均匀

检测波长：450nm、620nm双波长校正

标准曲线绘制：6梯度标准品，四参数拟合曲线，回归系数达标

特异性：特异性结合大鼠FS，与卵泡相关其他调控蛋白无交叉反应

重复性：板内CV＜7.5%，板间CV＜9.5%

注意事项：生殖相关样本需低温冻存，避免蛋白降解；操作轻柔，避免孔板液体溅出；洗涤充分，减少非特异性吸附
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

预包被板每孔上样标准品稀释液 49μL，待测卵泡组织上清样本 49μL，空白孔补缓冲液。

加入 HRP 酶标记抗体液 101μL，覆膜密封，37℃孵育 52min。

倾倒孔内液体，洗涤液浸泡 24s，拍干，连续洗板 4 次。

避光添加显色 AB 液各 50μL，轻微震荡板体，显色 18min。

终止液 50μL 每孔加入，终止反应并混匀液体。

酶标仪 450nm 检测吸光度，扣除空白孔基线。

依据标准曲线计算 FS 浓度，复孔结果差值过大重新实验。
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