大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒

本试剂盒采用特异性双抗体夹心酶免疫检测原理，预先在酶标板包被大鼠TIMP-3捕获抗体，孵育时可特异性结合标准品及待测样本中的TIMP-3抗原。洗涤去除未结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成免疫夹心复合物，随后进行底物显色与终止反应。检测所得吸光度值与样本中TIMP-3含量呈线性相关，依据标准曲线即可完成样本中TIMP-3的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 8ng/mL

反应时间：总反应时长130min（样本孵育70min、酶孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光保存，标准品复溶后建议一次性使用，避免失效

有效期：未开封12个月

显色系统：TMB-H2O2显色体系，酸性终止

检测波长：450nm，620nm校正

标准曲线绘制：6浓度梯度标准品上机，四参数拟合标准曲线，R²≥0.990

特异性：特异性靶向大鼠TIMP-3，与其他TIMP亚型无交叉识别

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤11%

注意事项：样本需无溶血、无浑浊，溶血样本会严重干扰检测结果
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

所有组分室温平衡 27min，配制洗涤工作液，梯度稀释 TIMP-3 标准品，取出对应酶标板条。

标准孔加梯度浓度标准品 50μL，样本孔加入稀释后样本 50μL，空白孔补稀释液。

全孔加入酶结合液 100μL，封板封口，37℃孵育 56min。

洗板 4 次，洗液浸泡 27s 每次，甩干液体后拍干板孔。

避光加入显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 12min。

加入终止液 50μL 混匀终止。

450nm 检测吸光度，换算 TIMP-3 样本含量。