大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA技术，酶标板包被大鼠MYO/MB特异性抗体，待测大鼠样本中的肌红蛋白抗原与包被抗体特异性结合，结合酶标记抗体后催化底物显色，依据吸光度数值和标准曲线，精准定量肌红蛋白含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL～20ng/mL

反应时间：总时长95min，孵育65min，显色15min，读数5min

保存条件：2～8℃避光冷藏，试剂密封完好

有效期：未开封6个月，开封后1个月内用完

显色系统：肌肉标志物专属TMB显色系统

检测波长：450nm检测波长

标准曲线绘制：梯度标准品拟合，四参数回归，R²≥0.991

特异性：特异性检测大鼠肌红蛋白，与肌球蛋白、肌动蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤9.5%

注意事项：肌肉损伤样本需及时处理；无溶血样本检测效果最佳；实验条件全程统一。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温放置 28min，梯度稀释肌红蛋白标准品，排布酶标板空白对照、标准、大鼠血清样本孔。

一步直接加样 100μL 标准品与稀释血清样本入对应孔，空白孔加入等量样本稀释液。

覆膜封口，37℃孵育 64min，完成肌红蛋白与包被抗体结合。

弃净孔内液体，洗涤液加满每孔静置 26s，洗板 4 次，倒扣拍干余液。

非空白孔加入酶联二抗工作液 100μL，避光封板孵育 23min。

加入显色 AB 混合底物液 100μL，轻摇混匀，37℃避光显色 11min。

终止液终止反应，450nm 测定 OD 值，对照标准曲线得出 MYO/MB 数值。