大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，预先将大鼠sTRAIL特异性捕获抗体包被于酶标板，待测样本中的sTRAIL抗原可与固相抗体特异性结合，洗去游离杂质后，加入酶标记检测抗体形成免疫夹心复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度，吸光度数值与样本sTRAIL含量正相关，通过标准曲线精准定量样本抗原浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒

英文名称：sTRAIL ELISA Kit
货号：Y-E1535

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度小于1.1 pg/mL

检测范围：5 pg/mL - 170 pg/mL

反应时间：全程130分钟（样本孵育70min、酶标孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃避光干燥保存，标准品低温避光存放

有效期：12个月

显色系统：HRP催化TMB底物显色，反应稳定、重复性好

检测波长：450nm，630nm校准

标准曲线绘制：四参数拟合曲线，R²≥0.990

特异性：特异性识别大鼠sTRAIL，与TNF-α、FASL等凋亡因子无交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：凋亡诱导样本需及时检测，防止蛋白降解；全程避光操作，避免试剂失活；洗板次数严格遵循说明书要求。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 34min，稀释浓缩洗涤液待用。

排布酶标板微孔，空白孔只加稀释液，梯度标准品、质控、待测稀释样本与酶结合试剂上样。

密封酶标板，37℃孵育 68min。

洗板 6 次，浸泡 34s / 次，彻底清除孔内残留洗液。

显色底物避光 37℃显色 18min。

终止液充分混匀终止反应。

450nm 波长测吸光度，换算 sTRAIL 蛋白含量。
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