大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法原理，酶标板包被大鼠sPECAM-1捕获抗体，待测样本中的sPECAM-1抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗涤去除未结合物质后，加入HRP标记检测抗体构建夹心复合物，显色终止后测定吸光度，吸光度值与样本sPECAM-1含量成正比，依托标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒

英文名称：sPECAM-1 ELISA Kit
货号：Y-E1401

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL

检测范围：4 pg/mL - 140 pg/mL

反应时间：全程120分钟（样本孵育60min、酶标孵育30min、显色30min）

保存条件：2-8℃密封避光保存，严禁冷冻结冰

有效期：未开封12个月，开封后1个月内用完

显色系统：稳定型TMB显色体系，背景值极低，灵敏度高

检测波长：450nm

标准曲线绘制：七点梯度拟合，R²≥0.991

特异性：专一靶向大鼠sPECAM-1/sCD31，无同类粘附分子交叉反应

重复性：板内CV＜7.5%，板间CV＜9.5%

注意事项：血小板聚集样本需充分离心取上清；显色时间精准控制，过长会导致背景升高；实验耗材需无菌无杂质。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂室温回温 26min，稀释洗涤缓冲液，调配酶应用液。

标记各孔用途，空白孔加稀释缓冲液，标准品、对照、待测稀释样本与酶试剂一同加入对应微孔。

封板 37℃孵育 62min。

洗板 5 次，浸泡 28s 每次，滤纸拍干板孔。

显色 AB 液避光反应 13min。

滴加终止液终止酶促显色。

酶标仪 450nm 检测数据，同步测定 sPECAM-1 与 sCD31 两项指标。
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