大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，固相包被大鼠sm Actinin-α特异性抗体，待测大鼠样本中的横纹肌辅肌动蛋白α抗原与抗体特异性结合，经酶标记二抗显色后，检测吸光度数值，结合标准曲线精准定量样本中靶蛋白含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL

检测范围：0.3ng/mL～9ng/mL

反应时间：总时长100min，孵育70min，显色15min，读数5min

保存条件：2～8℃干燥避光保存，试剂密封完好

有效期：原装6个月，开封后2周内使用

显色系统：经典TMB显色体系，反应稳定，无杂色干扰

检测波长：450nm检测波长

标准曲线绘制：梯度标准品检测，四参数回归拟合，R²≥0.990

特异性：特异性结合大鼠横纹肌辅肌动蛋白α，与平滑肌、心肌同源蛋白交叉反应率＜4%

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：肌肉组织样本需充分匀浆、离心取上清；避免样本中肌纤维杂质残留；严格控制孵育温度与时间。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒室温放置 31min，复溶 sm Actinin-α 冻干标准品配制梯度浓度，划分酶标板孔位组别。

直接向对应孔加入标准品、大鼠横纹肌组织匀浆样本 100μL，空白孔加入样本稀释液。

封板膜密封，37℃孵育 76min，特异性结合肌动蛋白 α 抗原。

弃液后洗涤液浸润每孔 35s，循环洗板 5 次，彻底洗去游离蛋白。

所有检测孔加入 HRP 标记抗体工作液 100μL，避光封板孵育 32min。

分加显色 A 液、B 液各 50μL，混匀避光显色 16min。

滴加终止液终止酶促反应，酶标仪 450nm 读取吸光度，计算目标蛋白浓度。