大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，包被大鼠PPAR-α特异性抗体于酶标板微孔，样本中的PPAR-α抗原与包被抗体特异性结合，结合酶标记检测抗体后发生显色反应，终止后读取吸光度，依据标准曲线精准定量大鼠样本中PPAR-α的表达含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤8pg/mL

检测范围：15pg/mL - 650pg/mL

反应时间：总反应时长160分钟（样本温育100分钟、酶二抗温育30分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光保存，严禁冷冻，试剂开封后密封防潮

有效期：未开封有效期8个月，开封后1.5个月内使用

显色系统：高灵敏度HRP-TMB显色体系

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数逻辑拟合，R²≥0.993

特异性：特异性结合大鼠PPAR-α，与PPAR-γ无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：细胞核蛋白样本需充分提取；全程低温操作，防止受体蛋白降解
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒室温回温 30min，溶解 PPAR-α 标准品配制系列梯度浓度，排布酶标板各功能孔。

一步上样：标准孔加梯度标准品 100μL，待测孔加大鼠肝脏核蛋白提取液 100μL，空白孔加稀释液。

密封酶标板，37℃恒温孵育 77min，捕获核内 PPAR-α 受体蛋白。

弃液后洗涤液浸润每孔 32s，循环洗板 5 次，拍干孔底多余洗液。

非空白孔加入 HRP 酶联检测抗体 100μL，避光封板孵育 29min。

分加显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 14min。

加入终止液终止酶促反应，酶标仪 450nm 读数，换算 PPAR-α 浓度。