大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接ELISA检测原理，预先将大鼠肌内膜纯化抗原包被于酶标板，待测样本中的抗肌内膜IgA抗体可与固相抗原特异性结合，洗去未结合杂质后，加入HRP标记的抗大鼠IgA特异性二抗孵育，使其与结合态的目标抗体结合，经显色、终止步骤后测定吸光度，吸光度值与样本中EMA IgA抗体含量成正比，依据标准曲线可完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒

英文名称：EMA IgA ELISA Kit
货号：Y-E1198

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.07ng/mL

检测范围：0.12ng/mL - 9ng/mL

反应时间：37℃恒温孵育160分钟

保存条件：所有试剂2-8℃避光密封保存，开封后1个月内用完

有效期：原装有效期12个月

显色系统：高灵敏单组分TMB显色体系，避光显色15分钟

检测波长：450nm单一检测波长

标准曲线绘制：四参数Logistic模型拟合标准曲线

特异性：特异性识别大鼠肌内膜IgA抗体，与IgG、IgM亚型无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤8.5%

注意事项：黏膜相关抗体检测需保证样本无污染；孵育全程密封，防止孔板液体蒸发
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂室温静置 35min，稀释浓缩洗涤缓冲液，准备酶工作液。

孔位分类加样，空白孔不加样本，标准品、质控、待测稀释样本与酶试剂一同加入对应微孔。

密封酶标板，37℃孵育 68min。

弃液洗板 5 次，每次浸泡 32s，吸干孔内残留洗液。

加入显色底物，避光 37℃显色 17min。

加入终止液终止反应，混匀。

450nm 测 OD 值，绘制标准曲线测定 EMA IgA 抗体含量。
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