大鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的大鼠IgE受体抗原包被于酶标板微孔内，封闭非特异性结合位点后，加入待测样本、标准品，样本中存在的抗IgE受体抗体可与包被抗原特异性结合，再加入酶标记二抗与结合的一抗结合，经底物显色、终止反应后，通过酶标仪测定各孔吸光度值，吸光度值与样本中大鼠抗IgE受体抗体含量呈正相关，依据标准曲线即可计算出样本中目标抗体的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒

英文名称：Rat anti-IgE receptor antibody ELISA Kit
货号：Y-E1336

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 8ng/mL

反应时间：整体孵育反应总时长120分钟

保存条件：试剂盒未开封2-8℃冷藏保存，严禁冷冻；开封后组分密封2-8℃存放

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月

显色系统：TMB底物显色系统，酸性终止液终止显色

检测波长：主检测波长450nm，参比波长630nm

标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，绘制四参数拟合标准曲线

特异性：与大鼠同类同源抗体无交叉反应，与小鼠、兔等异种物种抗体交叉反应率＜5%

重复性：板内变异系数CV≤8%，板间变异系数CV≤10%

注意事项：实验全程避免强光直射、高温环境；样本需新鲜无溶血、无脂血；试剂使用前需充分平衡至室温，避免试剂污染
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

取出试剂盒室温平衡 30min，配制洗涤液、样本稀释液与酶结合工作液。

设定空白孔、阴性对照孔、阳性对照孔、待测样本孔，每孔加入对应稀释后样本与酶标试剂。

封板膜密封酶标板，37℃恒温孵育 60min。

弃去孔内全部液体，洗板机洗板 5 次，每次浸泡 30s，拍干残留液体。

每孔依次加入显色液 A 液、显色液 B 液，轻柔震荡混匀，避光 37℃显色 15min。

加入终止液终止显色反应，轻晃酶标板混匀。

酶标仪 450nm 波长读取各孔 OD 值，对照标准曲线计算样本抗体浓度。
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