大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附原理，酶标板固相包被大鼠谷氨酸脱羧酶重组抗原，待测大鼠样本中的GAD-Ab可与固相抗原特异性结合，洗除未结合杂质后加入酶标记二抗，催化底物显色，吸光度值与样本中GAD-Ab含量正相关，通过标准曲线可精准检测大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤1U/mL

检测范围：2U/mL - 100U/mL

反应时间：总反应时长160分钟（样本温育90分钟、酶结合物温育40分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光密封保存，所有试剂禁止冷冻，开封后及时密封

有效期：未开封有效期12个月，开封后1.5个月内使用

显色系统：HRP-TMB显色体系，硫酸终止液终止反应

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数逻辑拟合，标准曲线相关性R²≥0.993

特异性：特异性结合大鼠GAD自身抗体，与胰岛细胞抗体无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：血清样本无溶血、黄疸；温育温度恒定37℃，湿度90%以上；空白、标准、样本同步操作
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒室温回温 26min，稀释 GAD-Ab 阳性标准品设置浓度梯度，排布酶标板空白、标准、大鼠血清样本孔。

直接向各孔加入标准品、预处理待测血清样本 100μL，空白孔加入样本稀释液。

覆膜封板，37℃孵育 85min，让 GAD-Ab 与板内包被谷氨酸脱羧酶抗原结合。

弃液后洗涤液加满每孔静置 28s，洗板 4 次，倒扣拍干残留洗液。

非空白孔加入酶标记二抗工作液 100μL，避光密封 37℃孵育 35min。

加入显色底物混合液 100μL，避光摇匀，37℃显色 15min。

终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，依据标准曲线计算 GAD-Ab 抗体水平。