大鼠高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒

本试剂盒采用高敏竞争性ELISA检测原理，微孔板固相包被u-T3特异性抗原，大鼠样本中的u-T3会与固相抗原竞争结合体系中的特异性一抗，洗板去除未结合物质后，加入酶标记抗体催化底物发生显色反应，反应终止后检测吸光度，吸光度与样本中u-T3浓度呈负相关，结合标准曲线可精准测定样本中u-T3含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.005ng/mL

检测范围：0.02ng/mL - 10ng/mL

反应时间：总反应时长110分钟（一抗温育50分钟、二抗温育30分钟、显色30分钟）

保存条件：试剂2-8℃避光保存，标准品、浓缩酶液单独密封冷藏，避免挥发失效

有效期：未开封有效期12个月，开封后密封冷藏可使用1.5个月

显色系统：改良型TMB显色体系，显色均匀、稳定性高

检测波长：450nm（检测）、570nm（校正）

标准曲线绘制：四参数逻辑拟合标准曲线，浓度梯度精准匹配，R²≥0.993

特异性：仅特异性识别大鼠u-T3，与T4、甲状腺球蛋白交叉反应率＜1%

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%

注意事项：样本采集后3000r/min离心10分钟分离血清；显色过程严格避光，终止后立即读数，避免数值衰减
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒从冷藏取出室温放置 35min，溶解冻干 u-T4 标准品后进行梯度稀释，规划酶标板排布组别。

直接一步加样，标准孔加不同浓度 u-T3 标准液 100μL，待测孔加大鼠上清样本 100μL，空白孔补稀释液。

封板膜封闭板面，37℃恒温孵育 65min，使样本中 u-T3 与固相载体抗体结合。

倾倒孔内液体，洗涤液加满每孔静置 35s，甩干洗涤，循环洗板 5 次，吸水纸吸干板底残液。

除去空白孔，其余孔添加辣根过氧化物酶标记二抗工作液 100μL，封板避光孵育 35min。

每孔分别滴加显色 A 液 50μL、显色 B 液 50μL，轻微振荡混匀，37℃避光显色 18min。

滴加终止液终止反应，酶标仪 450nm 检测 OD 数值，根据标准曲线方程计算大鼠样本 u-T3 浓度。