大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA 原理，酶标板预包被 PⅢNP 特异性捕获抗体，样本中 Ⅲ 型前胶原肽结合固相抗体，HRP 标记检测抗体结合靶蛋白，洗板显色后通过标准曲线定量血清、组织 PⅢNP 水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.22ng/mL，纤维化标志物专属检测

检测范围：0.45ng/mL - 45ng/mL

反应时间：总时长95分钟，样本孵育65分钟，二抗孵育30分钟

保存条件：2-8℃避光保存，试剂密封防污染

有效期：未开封原装6个月有效

显色系统：稳定TMB双组分显色体系

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：6梯度标准品，四参数拟合，R²≥0.996

特异性：专一靶向PⅢNP，与各类胶原肽段无交叉反应

重复性：板内CV≤4.8%，板间CV≤6.8%

注意事项：避免样本溶血、脂血；孵育过程保湿密封，防止液体蒸发影响浓度
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温平衡 21min，浓缩洗涤液稀释 20 倍，脏器匀浆上清混匀。

标准品稀释：PⅢNP 冻干标准品复溶梯度稀释 6 浓度，空白孔对照。

加样孵育：50μL 标准品 / 样本 + 50μL HRP 酶抗体，封膜 37℃避光孵育 59min。

洗板操作：洗涤液浸泡 30s，拍干残液，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 14min。

终止读数：终止液混匀，8min 内检测 OD450。

数据计算：标准曲线定量 PⅢNP，反映胶原纤维增生水平。