大鼠表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板固定抗大鼠EGFR特异性捕获抗体，加入梯度标准品和大鼠生物样本后，样本中的EGFR抗原被固相抗体特异性捕获，洗涤干净后加入辣根过氧化物酶标记的EGFR检测抗体，形成稳定的夹心复合物，底物显色后根据吸光度变化，对照标准曲线精准测定样本中EGFR的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒

英文名称：EGFR ELISA Kit
货号：Y-E1025

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤1.0pg/mL

检测范围：3pg/mL - 850pg/mL

反应时间：全程3.7小时

保存条件：2-8℃密封保存，受体试剂避免冻融

有效期：未开封6个月，开封后2个月有效

显色系统：受体蛋白专用TMB显色系统

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：7梯度标准品，四参数拟合曲线

特异性：特异性结合大鼠EGFR，不识别其他生长因子受体

重复性：板内CV≤7.5%，板间CV≤9.5%

注意事项：细胞组织样本充分裂解；避免受体蛋白变性失活
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

EGFR 标准品复溶配制梯度，试剂盒室温平衡 30min，标记酶标板孔类型；

标准孔加 50μL 梯度标准品，样本孔加入大鼠细胞裂解液 50μL，空白孔补稀释液；

全部微孔加入 100μL HRP 标记抗 EGFR 特异性抗体，密封酶标板；

37℃恒温孵育 67min，一步形成抗原酶标抗体复合物；

洗涤缓冲液浸泡 35s，吸干，循环洗板 5 次；

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反应 13min；

终止液终止反应，450nm 检测吸光度，换算 EGFR 浓度。
公司正在出售的产品：