大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测技术，微孔板预先包被抗大鼠cPLA2特异性捕获抗体，加入标准品与大鼠待测样本后，样本中的cPLA2抗原被固相抗体特异性捕获，洗板净化反应体系，加入HRP标记的cPLA2检测抗体形成夹心复合物，酶促底物显色后，显色强度与样本中cPLA2含量呈正相关，终止反应后检测吸光度，结合标准曲线实现精准定量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒

英文名称：cPLA2 ELISA Kit
货号：Y-E1021

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.8U/L

检测范围：2U/L - 200U/L

反应时间：全程4小时，酶蛋白特异性结合孵育

保存条件：2-8℃密封保存，酶类试剂禁止冻融

有效期：未开封6个月，开封后1.5个月有效

显色系统：适配酶蛋白检测的专用显色系统

检测波长：450nm主波长检测

标准曲线绘制：7梯度酶活性标准品，拟合活性标准曲线

特异性：特异性识别大鼠胞浆型磷脂酶A2，不结合膜型磷脂酶

重复性：板内CV≤7.2%，板间CV≤9.2%

注意事项：酶蛋白易失活，样本全程低温操作；避免高温、剧烈震荡
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

cPLA2 标准品稀释配制浓度梯度，试剂盒室温平衡 30min，划分酶标板孔；

标准孔添加 50μL 梯度标准品，样本孔加入大鼠组织胞浆上清 50μL，空白孔加稀释液；

加入 100μL 辣根酶标记抗 cPLA2 抗体，覆膜封闭；

37℃恒温孵育 62min，一步共孵育形成免疫复合物；

洗涤缓冲液浸泡 30s，拍干，连续洗涤 6 次；

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 16min；

终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，换算 cPLA2 浓度。
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