大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将高特异性抗大鼠Cys-C抗体包被于酶标板微孔中，作为固相捕获载体，样本中的Cys-C抗原可与固相抗体特异性结合，洗涤后加入酶标记的Cys-C检测抗体，形成特异性夹心免疫复合物，经TMB底物显色、终止液终止反应后，检测吸光度值，依据标准曲线线性关系，定量检测大鼠样本中Cys-C的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒

英文名称：Cys-C ELISA Kit
货号：Y-E1325

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.05ng/mL

检测范围：0.1ng/mL - 10ng/mL

反应时间：总时长3.5小时，精准定量检测流程

保存条件：2-8℃低温避光保存

有效期：原装试剂盒6个月，稳定性优异

显色系统：高精准定量TMB显色体系

检测波长：450nm/630nm双波长校正

标准曲线绘制：8低浓度梯度标准品，精细拟合标准曲线

特异性：特异性识别大鼠Cys-C，与其他蛋白酶抑制剂无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：肾功能相关指标检测，样本无溶血、无污染；低浓度样本严格把控操作精度
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂室温平衡 26min，梯度稀释 Cys-C 标准品，标记酶标板所有微孔；

各微孔加入 50μL 标准品或大鼠尿液 / 血清样本，空白孔补稀释缓冲液；

全部微孔加入 100μL HRP 标记抗 Cys-C 抗体，封板膜密封；

37℃避光孵育 56min，一步孵育免疫结合；

洗板液浸泡微孔 40s，吸干，洗板 5 次；

避光添加显色底物混合液 100μL，37℃避光显色 13min；

终止液混匀，450nm 检测吸光度，计算 Cys-C 含量。
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