大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒

双抗体夹心免疫酶联原理，固相载体预包被 CTX-Ⅰ 特异性捕获抗体，样本中骨代谢标志物 CTX-Ⅰ 结合板底，酶标二抗结合抗原另一表位，洗涤显色后 OD 值对应 CTX-Ⅰ 含量，用于骨吸收指标定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.2ng/mL，精准检测骨代谢降解标志物

检测范围：0.4ng/mL - 40ng/mL

反应时间：总时长95分钟，样本孵育65分钟，二抗孵育30分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏，标准品开封后分装冻存

有效期：原装试剂盒6个月，分装标准品3个月有效

显色系统：高灵敏TMB显色系统，适配肽类小分子检测

检测波长：450nm、630nm双波长校正

标准曲线绘制：6浓度梯度，四参数拟合，R²≥0.996

特异性：专一识别CTX-Ⅰ端肽，与Ⅰ型胶原完整蛋白、其他胶原端肽无交叉反应

重复性：板内CV≤4.8%，板间CV≤6.8%

注意事项：血清样本新鲜制备，避免肽段降解；全程低温操作，防止标志物分解；加样均匀，减少孔间误差
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂室温平衡 22min，洗涤液稀释 20 倍，血清样本充分混匀无沉淀。

标准品稀释：CTX-Ⅰ 冻干标准品稀释配制 6 梯度标准液，空白调零孔。

加样孵育：每孔 50μL 标准品 / 样本，酶结合物 50μL，密封 37℃避光孵育 59min。

洗板操作：洗涤液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 14min。

终止读数：终止液混匀，8min 内读取吸光值。

数据计算：曲线计算 CTX-Ⅰ 浓度，评价骨吸收水平。