大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA核心检测原理，酶标板微孔预先包被抗大鼠LIFR特异性抗体作为捕获抗体，加入待测样本和标准品后，样本中的LIFR抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离杂质与未结合蛋白，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体形成免疫夹心结构，底物显色后颜色深浅对应LIFR浓度高低，终止反应后上机读数，结合标准曲线完成定量分析。
基本参数‌：

产品名称：大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒

英文名称：LIFR ELISA Kit
货号：Y-E1432

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤1.5pg/mL

检测范围：4pg/mL - 950pg/mL

反应时间：总时长4小时

保存条件：2-8℃避光密封保存，严禁冷冻试剂

有效期：未开封6个月，开封后1个月用完

显色系统：稳定型TMB-HRP显色系统

检测波长：450nm单一精准波长

标准曲线绘制：7梯度标准品，四参数Logistic拟合

特异性：特异性结合大鼠LIF受体，不识别LIF配体及其他细胞因子受体

重复性：板内CV≤7.8%，板间CV≤9.8%

注意事项：受体蛋白易失活，样本需低温保存；试剂平衡室温后再进行实验操作
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

LIFR 标准品复溶配制梯度，试剂盒室温平衡 30min，排布酶标板孔位；

标准孔加 50μL 标准品，样本孔加入大鼠细胞匀浆上清 50μL，空白孔加稀释液；

快速加入 100μL 酶标记抗 LIFR 抗体，密封酶标板；

37℃恒温孵育 68min，一步完成样本抗原与标记抗体结合；

洗涤液浸泡微孔 35s，彻底拍干，重复洗涤 6 次；

避光加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光反应 15min；

终止液终止显色，450nm 测 OD 值，对照曲线计算 LIFR 浓度。
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