大鼠26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA试剂盒

双抗体夹心 ELISA，酶标板预包被抗大鼠 26S PSM 捕获抗体，样本中 26S 蛋白酶体与固相抗体特异性结合，再加入酶标检测抗体形成夹心免疫复合物，充分洗涤后底物显色，吸光度数值对应靶蛋白浓度，通过标准曲线完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.15ng/mL，适配组织、细胞匀浆样本微量检测

检测范围：0.3ng/mL - 30ng/mL

反应时间：总反应时长105分钟，样本孵育70分钟，二抗孵育35分钟

保存条件：试剂盒2-8℃避光冷藏，蛋白类试剂严禁反复冻融

有效期：原装未拆封有效期6个月

显色系统：稳定型TMB底物显色，显色均匀，无批次差异

检测波长：450nm、630nm双波长检测校正

标准曲线绘制：6个浓度梯度，四参数拟合曲线，R²≥0.995

特异性：特异性结合大鼠26S蛋白酶体，不与20S蛋白酶体及其他蛋白酶交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7.5%

注意事项：组织匀浆需充分裂解、高速离心去除残渣；样本避免高温处理，防止蛋白变性；孵育温度严格恒定37℃
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂室温平衡 22min，浓缩洗涤液稀释 20 倍，组织匀浆样本冰上放置至室温。

标准品稀释：26S PSM 标准品溶解后梯度稀释，6 个浓度梯度，设立空白孔。

加样孵育：各孔 50μL 标准品 / 样本，加入酶结合物 50μL，封膜 37℃避光孵育 62min。

洗板操作：弃液，洗涤液浸泡 32s，拍干，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL 每孔，避光 37℃孵育 14min。

终止读数：终止液混匀，9min 内读取 450nm 吸光度。

数据计算：标准曲线定量样本内 26S 蛋白酶体蛋白表达量。