大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒

基于竞争酶联免疫分析法，板底预包被 17-OHP 重组抗原，样本内大鼠 17 羟孕酮与固相抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记抗 17-OHP 抗体，洗涤除去游离组分后底物显色，吸光值随样本 17-OHP 浓度升高而降低，利用梯度标准品曲线实现激素精准定量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.3ng/mL，可检出极低浓度血清17-OHP指标

检测范围：0.6ng/mL - 60ng/mL

反应时间：整体反应85分钟，样本孵育55分钟，二抗孵育30分钟

保存条件：试剂盒所有组分2-8℃避光保存，开盖后试剂封口保存，防止挥发污染

有效期：未开封有效期6个月，开封后建议1个月内用完

显色系统：高稳定性TMB显色底物，显色速率均匀，终止后颜色稳定持久

检测波长：450nm单一主波长检测

标准曲线绘制：6梯度标准品稀释，四参数拟合标准曲线，线性相关系数R²≥0.996

特异性：专一识别大鼠17羟孕酮，与其他孕激素、类固醇激素无交叉结合反应

重复性：板内变异系数≤5%，板间变异系数≤7%

注意事项：避免使用溶血、黄疸血清样本；试剂平衡室温后混匀使用，无沉淀方可上机；显色终止后立即读数，防止数值漂移
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒置于室温平衡 20min，浓缩洗涤液稀释 20 倍备用，冻存样本提前冰上融化平衡。

标准品稀释：17-OHP 标准品干粉溶解后，倍比稀释 6 个梯度浓度，单独设置空白调零孔。

加样孵育：每孔加入 50μL 标准品 / 待测样本，再添加 50μL 酶标记抗体，密封封板膜，37℃避光孵育 55min。

洗板操作：排空孔内液体，洗涤液浸泡每孔 30s，拍干孔底残留液体，重复洗板 5 次。

底物显色：每孔加显色液 A、B 各 50μL，避光 37℃反应 12min，观察蓝色深浅区分浓度梯度。

终止读数：添加终止液终止酶促反应，混匀后 8min 内检测 450nm OD 数值。

数据计算：绘制标准曲线，将样本吸光度代入公式，计算样本中 17 - 羟孕酮表达水平。